产品名称 : | PH1785 | 蜗牛酶 Snailase |
产品品牌 : | 飞净 PHYGENE |
产品及特点:
本产品是从蜗牛(Helix pomatia)的嗦囊和消化道中制备的混合酶,它含有β-glucoronidase、endo-β-glucanase、arylsulphatase、纤维素酶,果胶酶,淀粉酶,蛋白酶等20多种酶,呈褐色结晶粉末。可以用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球制备等。
蜗牛酶一种混合酶制剂。主要含有纤维素酶、蛋白水解酶和果胶酶等二、三十种酶。酶反应:酵母细胞经巯基化合物(如硫代乙醇酸 钠等)预处理后,悬浮于pH5.8-7.2等渗的山梨醇溶液中,每克细胞经30-40mg的酶在37℃保温1小时即可溶解细胞壁,得到球形体、破壁率可达90%以上。用于溶解细胞壁。
运输与保存:常温运输,2~8℃保存,有效期2年
英文名称:Snailase
别名:蜗牛酶;褐云玛瑙螺;Snail enzymes
溶解性:200mg/mL in Water
使用方法:
使用本产品处理酵母细胞举例:
1.配制山梨醇缓冲液(10mL):1.82g山梨醇、0.042g柠檬酸钠,用10 mL pH5.8的磷酸钾缓冲液溶解,涡旋震荡混匀,超净台中,滤器过滤除菌。
2.取5 mL 山梨醇缓冲液加入到装有1g蜗牛酶的棕色瓶中,轻轻摇动混匀,使蜗牛酶溶解,使用之前用枪头挑一下瓶底,看是否有未溶解的酶,若有沉淀,则继续摇动或用枪头吹吸,使其溶解,得到的溶液为浓度是200mg/mL的蜗牛酶溶液。
3.取3-5 mL酵母细胞,200μL无菌水洗涤菌体(吹吸重悬),室温10000rpm离心1min,弃上清。重复洗涤2-3次。
4.将酵母细胞重悬于300-500μL巯基化合物中,32℃水浴15-30min。期间轻轻颠倒离心管两三次。
5.室温10000rpm离心1min,弃上清。将沉淀重悬浮于500 μL山梨醇缓冲液中。
6.按照每克细胞30-40mg蜗牛酶的比例,加适量体积的第2步配制的蜗牛酶溶液到酵母细胞溶液中,37℃保温1小时。(破壁率一般达90%以上。)
7.4℃保存或直接用于核酸、蛋白质提取制备。
附:巯基化合物配制方法
巯基化合物(0.04M EDTA和0.14M β-巯基乙醇)(30mL):
0.5M EDTA 2.4ml
巯基乙醇(分析纯ρ=1.11439g/mL) 294μl
无菌水 27.3ml
常见问题
蜗牛酶活性是多少?
您好,蜗牛酶是混合酶制剂不是单一一种酶,标签上有消化破壁效率,每g细胞是用30-40mg蜗牛酶37℃消化1h,细胞破壁率一般能达到90%
温馨提示:1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
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