PH0219 | 粪便基因组DNA提取试剂盒 Stool Genomic DNA Extraction Kit

产品简介

本试剂盒适合于从各种粪便中提取微生物 DNA。试剂盒中含有对粪便中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物 DNA 的多态性。

使用本试剂盒提取的 DNA 产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。

试剂组分

使用说明： 

*使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1. 称取粪便样本 50-200mg，加入 400μL-800μL 溶液 A，冰上放置 10min，12000g 离心 1min。

2. 弃上清，沉淀中加入 400μL 溶液 B，20μL 10mg/mL RNA 酶 A ，20μL 10mg/mL 蛋白酶 k， 涡旋 30s，65℃水浴 30-60min，期间颠倒数次，12000g 离心 2min。

3. 取上清于 1.5mL 离心管中，加入 300-600μL 溶液 C，12000g，离心 1-2min，转移上清至过滤 柱中（过滤柱放在收集管中），然后 12000 rpm 离心 1 min。

4. 吸取滤液至 DNA 吸附柱中，室温静置 1-2min，12000g 离心 0.5-1min（可重复一次）。

5. 倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液 500μL，12000 rpm 离心 1min。（重复一次）

6. 倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000 rpm 离心 0.5-1min。

7. 拿出吸附柱在室温干燥数分钟。

8. 将吸附柱放入一个新的离心管中，加入 50-100μL 洗脱液(65 ℃预热)，12000 rpm 离心 1min。

9. 将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000 rpm 离心 1min。离心管中即为粪便微生物 DNA溶液。

注意事项:

1. 新鲜的粪便样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。

2. 若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。

3. 在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。

4. 洗脱缓冲液的体积最好不少于 50μL，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA 应保存在-20 ℃避免反复冻融，以防降解。

5. 液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗