PLM038 | 奥氏试剂(Offner's Reagent) 还原糖定量滴定检测专用

【原理】

在沸腾条件下,还原糖与过量奥氏试剂反应生成相当量的 Cu2O 沉淀,冷却后加入盐酸使溶液呈酸性,并使 Cu2O 沉淀溶解。然后加入过量碘溶液进行氧化,用硫代硫酸钠溶液滴定过量的碘,其反应式如下:

C6H12O6 +2C4H2O6 KNaCu+2H2O →C6H12O7 +2C4H4O6KNa+CuO↓

葡萄糖或果糖 络合物 葡萄糖酸 酒石酸钾钠 氧化亚铜

Cu2O↓ +2HCl →2CuCl+H2O

2CuCl+2KI+I2 →2CuI2 +2KCl

I2 (过剩的) +2Na2S2O3 → Na2S4O6 +2NaI

硫代硫酸钠标准溶液空白试验滴定量减去其样品试验滴定量得到一个差值,由此差值便可计算出还原糖的量。

24 仪器和设备

24.1 天平:感量为0.1mg。

24.2 水浴锅。

24.3 可调温电炉或性能相当的加热器具。

24.4 酸式滴定管:25mL。

25 分析步骤

25.1 试样溶液的制备

25.1.1 将备检样品清洗干净。取100g(精确至0.01g)样品,放入高速捣碎机中,用移液管移入100mL的水,以不低于12000r/min的转速将其捣成1∶1的匀浆。

25.1.2 称取匀浆样品25g(精确至0.001g),于500mL具塞锥形瓶中(含有机酸较多的试样加粉状碳酸钙0.5g~2.0g调至中性),加水调整体积约为200mL。置80℃±2℃水浴保温30min,其间摇动数次,取出加入乙酸锌溶液 5mL和亚铁氰化钾溶液 5mL,冷却至室温后,转入250mL 容量瓶,用水定容至刻度。摇匀,过滤,澄清试样溶液备用。

25.2 Cu2O沉淀生成

吸取试样溶液20.00mL(若样品还原糖含量较高时,可适当减少取样体积,并补加水至20mL,使

试样溶液中还原糖的量不超过20mg),加入250mL锥形瓶中。然后加入奥氏试剂50.00mL,充分混合,用小漏斗盖上,在电炉上加热,控制在3min中内加热至沸,并继续准确煮沸5.0min,将锥形瓶静置于冷水中冷却至室温。

25.3 碘氧化反应

取出锥形瓶,加入冰乙酸1.0mL,在不断摇动下,准确加入碘标准滴定溶液5.00mL~30.00mL,

其数量以确保碘溶液过量为准,用量筒沿锥形瓶壁快速加入盐酸 15 mL,立即盖上小烧杯,放置约

2min,不时摇动溶液。

25.4 滴定过量碘

用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定过量的碘,滴定至溶液呈黄绿色出现时,加入淀粉指示剂2mL,继

续滴定溶液至蓝色褪尽为止,记录消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液体积(V4)。

25.5 空白试验

按上述步骤进行空白试验(V3),除了不加试样溶液外,操作步骤和应用的试剂均与测定时相同。

26 分析结果表述

试样品的还原糖按式(7)计算。

式中:

X ———试样中还原糖的含量,单位为克每百克(g/100g);

K ———硫代硫酸钠标准滴定溶液[c(Na2S2O3)=0.0323mol/L]校正系数;

V3 ———空白试验滴定消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液体积,单位为毫升(mL);

V4 ———试样溶液消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液体积,单位为毫升(mL);

V5 ———所取试样溶液的体积,单位为毫升(mL);

m ———试样的质量,单位为克(g);

250———试样浸提稀释后的总体积,单位为毫升(mL)。

计算结果保留两位有效数字。

27 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5% 。

28 其他

当称样量为5g时,定量限为0.25g/100g。